SIEMBRA POR ESTRIA EN PLACA — Transcript

Los medios sólidos contenidos en cajas de Petri se inoculan mediante la técnica de siembra por estría, la que puede ser:

Recta

u ondulada.

Estas técnicas generalmente se emplean para aislar a los microorganismos,

observar características coloniales,

y algunas características metabólicas.

Para realizar esta siembra empleamos:

Una asa bacteriológica.

Un mechero.

Cajas de Petri con medio de cultivo y un cultivo de bacterias o levaduras.

A continuación, procederemos a efectuar la siembra, para lo cual, podemos utilizar alguna de las siguientes técnicas.

Esta se emplea para observar alguna característica metabólica

o algún efecto antagónico.

Trabajando siempre en condiciones asépticas,

tomamos el inóculo.

Abrimos la caja.

Y trazamos una o varias líneas rectas en la superficie del medio.

Cerramos la caja y la colocamos en posición invertida.

Finalmente, esterilizamos el asa, comenzando de la base hacia la punta.

Una de ellas es la estría continua.

Para realizarla, colocamos el asa que contiene el inóculo en una posición ligeramente inclinada en un punto de la periferia de la placa.

Distribuimos el inóculo con estrías cerradas hasta cubrir una tercera parte de la superficie del medio.

Y sin separar el asa, la colocamos en posición vertical y continuamos trazando las estrías más separadas hasta cubrir toda la superficie.

Otra forma en que podemos inocular la placa es realizando el estriado en cuadrantes.

Para ello, marcamos los cuadrantes en la base de la caja.

Después, tomamos el inóculo con el asa.

Y lo colocamos en un punto de la periferia del primer cuadrante y trazamos estrías cerradas hasta llegar casi al centro de la placa, procurando no tocar las líneas divisorias.

Tapamos la caja y la giramos a la posición del segundo cuadrante.

Esterilizamos el asa desde la base a la punta. Enfriamos, tomamos inóculo de la última estría del primer cuadrante y estriamos el segundo cuadrante.

Este procedimiento se repite con el tercer y cuarto cuadrante,

tomando para ello el inóculo del cuadrante anterior.

Una vez que hemos terminado de inocular la placa, la cerramos y la colocamos en posición invertida sobre la mesa.

Y esterilizamos el asa.

En este caso, distribuimos el inóculo hasta aproximadamente la tercera parte de la caja mediante estrías cerradas.

Tapamos la caja y la giramos aproximadamente 90 grados con respecto a la zona estriada.

Procedemos a estriar la segunda sección hasta una tercera parte del área, teniendo cuidado de no tocar las estrías previas.

Cerramos la caja y la giramos nuevamente 90 grados y realizamos la misma operación dos veces más.

En esta, después de estriar el primer sector, se esteriliza el asa.

Se deja enfriar y se cruza la parte final de las últimas estrías y se procede a estriar la segunda sección.

Esto se repite en las siguientes secciones.

Independientemente de la técnica que se emplee, la finalidad de la siembra por estría ondulada en caja es la obtención de colonias aisladas.

Es importante abrir la caja lo suficiente para realizar la manipulación.

Recuerda que mientras trabajemos en la zona de asepsia, nuestro cultivo no se contaminará.

En la estría cruzada, es importante que el asa se encuentre estéril y fría antes de inocular cada cuadrante.

Como hemos visto, con la estría recta podemos observar alguna característica metabólica o efecto antagónico.

En tanto que con la ondulada, en cualquiera de sus modalidades, se asegura la dilución progresiva de la muestra en la superficie del agar, lo que nos permitirá obtener colonias aisladas.