Speaker A
La Universidad Nacional Autónoma de México, a través de la Facultad de Química y de su Laboratorio de Microbiología Experimental,
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Speaker A
presenta.
Speaker A
Siembra en medio líquido.
Speaker A
Esta técnica se emplea para preparar dilusiones, enriquecer un inóculo, homogeneizarlo o bien para cuantificar.
Speaker A
Un mechero.
Speaker A
El asa bacteriológica.
Speaker A
O un hisopo.
Speaker A
O pipetas, ya sea serológica, Pasteur o automática.
Speaker A
Tubos o matraces con el medio de cultivo líquido o con solución salina.
Speaker A
Y una muestra líquida.
Speaker A
Para efectuar la transferencia de la alícuota, empleamos dispositivos estériles.
Speaker A
Y realizamos todas las manipulaciones en una zona aséptica.
Speaker A
Para llevar a cabo la transferencia con el asa, primero debemos esterilizarla y dejarla enfriar dentro de la zona aséptica.
Speaker A
Tomamos el tubo que contiene la muestra líquida, lo homogeneizamos y destapamos cerca del mechero.
Speaker A
Flameamos la boca del tubo, introducimos el asa hasta sumergirla en la muestra y la sacamos de manera vertical, evitando tocar las paredes del mismo.
Speaker A
Teniendo cuidado de que en el arillo se mantenga una película del inóculo.
Speaker A
Manteniendo el asa en el área aséptica, tapamos el tubo.
Speaker A
En zona aséptica, destapamos el matraz donde colocaremos el inóculo, flameamos la boca e introducimos el asa con el inóculo, el que dispensaremos en el medio agitando el asa suavemente.
Speaker A
Por último, sacamos el asa, flameamos la boca del matraz, lo tapamos y esterilizamos el asa.
Speaker A
Para realizar la transferencia con hisopo, este debe estar previamente estéril.
Speaker A
Sacamos el hisopo en condiciones de asepsia.
Speaker A
Sujetamos el tubo que contiene la muestra y lo destapamos asépticamente.
Speaker A
Flameamos la boca e introducimos el hisopo y lo impregnamos con la muestra.
Speaker A
Eliminamos el exceso de inóculo, presionándolo contra la pared interna del tubo.
Speaker A
Sacamos el hisopo y tapamos el tubo.
Speaker A
Sujetamos el tubo donde colocaremos el inóculo.
Speaker A
Lo abrimos en condiciones asépticas.
Speaker A
Introducimos el hisopo y lo agitamos dentro del medio.
Speaker A
Quitamos el exceso de líquido en el hisopo.
Speaker A
Lo retiramos y tapamos el recipiente.
Speaker A
Por último, colocamos el hisopo en un contenedor de residuos biológico infecciosos para su posterior esterilización.
Speaker A
Antes de tomar la muestra, desenvolvemos la pipeta o la sacamos del cilindro de esterilización.
Speaker A
Le colocamos un bulbo o propipeta y la mantenemos cerca del mechero.
Speaker A
En condiciones asépticas, abrimos el recipiente que contiene la muestra, introducimos la pipeta y succionamos el volumen de inóculo deseado.
Speaker A
Retiramos la pipeta del recipiente, la mantenemos en posición vertical en el área de asepsia, flameamos la boca del recipiente y lo tapamos.
Speaker A
Sujetamos el recipiente donde colocaremos el inóculo.
Speaker A
Lo acercamos al mechero.
Speaker A
Destapamos, flameamos la boca, introducimos la pipeta y liberamos el inóculo.
Speaker A
Recuerda que esta operación también se realiza en condiciones asépticas.
Speaker A
Después, flameamos la boca del recipiente y lo tapamos.
Speaker A
Por último, colocamos la pipeta en un recipiente con desinfectante.
Speaker A
La transferencia con pipeta automática es similar a la descrita anteriormente, pero en este caso, lo que debemos mantener en la zona aséptica es la punta intercambiable, ya que esta es la que entrará en contacto con la muestra y el medio de cultivo a inocular.
Speaker A
Los puntos críticos para efectuar una transferencia adecuada son:
Speaker A
Mantener en todo momento el dispositivo empleado dentro de la zona aséptica.
Speaker A
Evitar tocar con las manos la punta de la pipeta serológica, Pasteur o la intercambiable, o entre en contacto con material no estéril.
Speaker A
Sostener la pipeta firmemente para evitar que esta oscile y salga de la zona de asepsia o entre en contacto con material no estéril.
Speaker A
Es importante que al iniciar el trabajo, tengamos organizado todo el material que utilizaremos, incluyendo un recipiente con solución desinfectante para el desecho de las pipetas o puntas.
Speaker A
Como hemos visto, para transferir inóculos líquidos a medios de cultivo líquidos,
Speaker A
podemos utilizar asa bacteriológica.
Speaker A
Hisopo.
Speaker A
Pipeta Pasteur.
Speaker A
Pipeta serológica o pipeta automática.
